Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям...

^ Противопоказания к заготовке стволовых клеток
Абсолютные противопоказания к заготовке стволовых клеток - заболевания: ВИЧ, гепатит В и С, вирусу Т - клеточного лейкоза человека, токсоплазмоз, сифилис.

^ Относительные противопоказания к заготовке стволовых клеток: объем пуповинной крови наименее 50-60 мл Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям..., низкое содержание стволовых клеток в объеме приобретенной пуповинной крови.
  1. ^ Исцеление стволовыми клеточками

Стволовые клеточки (за редчайшим исключением) не "вылечивают" болезнь. Их роль заключается в восстановлении костного мозга, крови и иммунной Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... системы пациента после проведения сочетанного исцеления основного заболевания. Радио- и химиотерапия обычно удачно управляются с ликвидированием, например, раковых клеток. Но, вместе с "ненужными" клеточками, высочайшие дозы препаратов оказывают негативное воздействие и на организм в Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... целом, - гибнет костный мозг, поточнее, находящиеся в нем стволовые клеточки. Этим диктуется необходимость следующей трансплантации.

Поновой введенные стволовые клеточки репопулируют (обживают) погибший костный мозг, плодятся и восстанавливают его, начиная делать работу погибших Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... клеток.

Это свойство стволовых клеток употребляется и при ряде наследных заболеваний крови. В данном случае донорские "здоровые" клеточки трансплантируются после того, как свой "дефектный" костный мозг тоже убивается, но уже Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... целенаправленно.

Не считая источника получения стволовых клеток меж ними огромное количество других различий. Более принципиальное - их способность выживать в лаборатории без дифференциации. Эмбриональные стволовые клеточки способны реплицироваться, оставаясь недифференцированными в течение года, что для Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... стволовых клеток из взрослых организмов недостижимо.

За последние годы размещены сотки сообщений о применении соматических стволовых клеток (сначала кроветворных стволовых клеток) в опыте и поликлинике. В связи с этим эмбриональные стволовые Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... клеточки кажутся более симпатичными, так как подтверждена их способность (в эмбриональном микроокружении) генерировать все клеточные типы. На практике, но, очень тяжело получить в культуре из эмбриональных стволовых клеток тот тип клеток, который планируется Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям....

^ Какова процедура исцеления стволовыми клеточками?

Процедура исцеления стволовыми клеточками состоит из 3-х шагов. На первом шаге мы получаем маленькое количество Ваших стволовых клеток, помещаем их в лабораторию и выращиваем в Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... течение 45 - 60 суток до количества более 200 000 000 клеток. Обычно, таковой объем стволовых клеток достаточен для исцеления многих заболеваний.

2-ой и 3-ий этапы – введение стволовых клеток. Единоразовое введение – менее 100 000 000 клеток. Интервал меж процедурами введения стволовых клеток Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... составляет от 3 до 6 месяцев зависимо от советов доктора Поликлиники.

Введение стволовых клеток происходит амбулаторно, без дополнительной подготовки пациента. В течение 40 минут через капельницу стволовые клеточки вводятся Вам внутривенно и с Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... кровотоком поступают к органу либо ткани, который нужно вылечить.

Исцеление стволовыми клеточками – процедура, экономящая Ваше время и усилия. Благодаря малому времени Вашего роли в лечении, клеточная терапия совершенно подходит для занятых энергичных людей, ценящих свою Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... свободу.

^ 5. Как действуют стволовые клеточки?

Стволовые клеточки способны стать всеполноценными клеточками фактически хоть какого органа либо ткани. Мезенхимальные стволовые клеточки уникальны собственной универсальностью, способностью дифференцироваться в клеточки хоть какого органа (кардиомиобласты Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... – клеточки сердца, гипотоциты – клеточки печени, альвиолы – клеточки легких, нейроны – клеточки мозга, хондробласты – клеточки хрящевой ткани, миобласты – клеточки мускул и др.).

После процедуры введения стволовые клеточки прикрепляются к здоровым участкам покоробленного Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... органа. Стволовые клеточки поочередно теснят покоробленные заболеванием клеточки органа и замещают их, трансформируясь в клеточки данного органа. Результаты клеточной терапии диагностируются спустя 3 месяца, а личные чувства конфигурации самочувствия начинаются на 2-ой денек после процедуры введения Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям....

^ 5.3. Самостоятельная работа по теме:

Обучающийся должен ознакомиться с текстом учебных пособий и показать последующие умения:


№ п/п

Заглавие практических умений

1

Систематизировать методы получения эмбриональных стволовых клеток.

2

Систематизировать методы получения региональных стволовых Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... клеток.

3

Соотносить виды стволовых клеток по методу получения с их вероятным применением в медицине.


^ 5.4. Итоговый контроль познаний:

- ответы на вопросы по теме занятия:

1. Чем разъясняется, что работу со стволовыми клеточками связывают с вопросами биоэтики?

2. Назовите Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... главные методы получения стволовых клеток.

3. В чём заключается метод использования ЭСК (эмбриональных стволовых клеток)? Какие разновидности этого метода получения стволовых клеток вы понимаете?

4. В каком случае употребляют для получения ЭСК (эмбриональных Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... стволовых клеток) зародыши, приобретенные в итоге клонирования?

5. Какие правила должны быть соблюдены при получении и использовании ЭСК?

6. Почему в использовании абортивного материала в особенности остро стоят вопросы биоэтики?

7. Какой из Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... методов получения ЭСК (эмбриональных стволовых клеток) более распространён в получении, но не биоэтичен. Почему?

8. В чём заключается особенность получения пуповинной крови?

9. Каким образом она сохраняется и применяется в последствии?

10. В чём достоинства Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... в применении пуповинной крови?

11.Какие методы получения РСК (региональных стволовых клеток) человека вы понимаете? Поясните их особенности и значение.

12. Назовите заболевания, для исцеления которых употребляются стволовые клеточки.

13. Поясните показания к применению стволовых клеток.

14. Каким образом Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... осуществляется исцеление стволовыми клеточками?

15. В чём заключается процедура исцеления стволовыми клеточками?


- решение ситуационных задач:

Задачка № 1.

В первый раз в Рф в 2009 году разработан и апробирован способ получения аутологичных индуцированных плюрипотентных стволовых клеток Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... из обыкновенной клеточки взрослого организма.

  1. Какой способ был применен?

  2. Какой материал был применен?

  3. Какие конфигурации происходили в клеточках?


Задачка № 2.

Представлены аутологичные и донорские стволовые клеточки.

1.Какие стволовые клеточки именуются аутологичными?

2.Какие стволовые Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... клеточки имеют достоинства для транстплантации?

3.Перечислите ряд преимуществ аутологичных стволовых клеток перед донорскими.


Задачка № 3.

.В лаборатории получили бластоцисту.

1.Какую часть клеточного материала можно взять для получения стволовых клеток?

2. Какие ткани образуют эти Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... клеточки?

  1. В каком году и где были в первый раз получены эти клеточки?


Задачка № 4.

Главным источником сырья для получения лабораторных стволовых клеток остаются эмбриональные стволовые клеточки.

1.Из чего получают эмбриональные стволовые клеточки Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям...?

2.В какой период жизни вступают эти выделенные клеточки?

3.В обход какого процесса эмбриогенеза идёт этот период?


Задачка № 5.

Имеются стволовые клеточки и зрелые.

  1. Каким методом делятся те и другие?

  2. Чем Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... отличается деление стволовой клеточки от деления зрелой?

  3. Что происходит с образовавшимися клеточками после деления?


^ 6. Домашнее задание для уяснения темы занятия (ответить на контрольные вопросы и тестовые задания, решить ситуационные задачки по теме Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... «Способы культивирования стволовых клеток», методические указания для обучающихся № 10 к внеаудиторной работе).


^ 7. Советы по выполнению НИРС, в том числе перечень тем, предлагаемых кафедрой

Приготовить рефераты на темы:

1. Современные представления о происхождении клеток крови.

2. Аутологический Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... метод получения стволовых клеток.

3. Способ селезёночных колоний и его значение для получения стволовых клеток крови.

4. Внедрение абортивных материалов для получения стволовых клеток.


^ 1. Занятие № 10

Тема: «Способы культивирования стволовых клеток».


2. Форма организации учебного процесса: практическое Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... занятие.

Разновидность занятия: беседа, консультирование. Способы обучения: работа с учебниками, конспектирование, упражнение, решение тестов и ситуационных задач, подготовка ответов на вопросы, передний опрос.


^ 3. Значение исследования темы. Методы культивирования и этичности использования СК (стволовых клеток Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям...) различного происхождения.


4. Цели обучения:

- общая (обучающийся должен владеть ОК и ПК);

- способностью и готовностью рассматривать социально-значимые задачи и процессы, использовать на практике способы гуманитарных, естественнонаучных, медико-биологических и клинических Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... наук в разных видах проф и социальной деятельности (ОК-1);

способностью и готовностью к логическому и аргументированному анализу, к общественной речи, ведению дискуссии и полемики (ОК-5);

- способностью и готовностью выявлять естественнонаучную суть заморочек, возникающих в Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... процессе проф деятельности врача-педиатра, использовать для их решения соответственный физико-химический и математический аппарат (ПК-2);

- способностью и готовностью к формированию системного подхода к анализу мед инфы, делая упор Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... на всеобъятные принципы доказательной медицины, основанной на поиске решений с внедрением теоретических познаний и практических умений в целях совершенствования проф деятельности (ПК-3);

- способностью и готовностью рассматривать закономерности функционирования отдельных органов и систем, использовать Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... познания анатомо-физиологических основ, главные методики клинико-иммунологического обследования и оценки многофункционального состояния организма деток и подростков для своевременной диагностики болезней и патологических процессов (ПК-16);

- способностью и готовностью учить научно-медицинскую информацию, российский и Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... забугорный опыт по теме исследования (ПК-31);

способностью и готовностью к роли в освоении современных теоретических и экспериментальных способов исследования с целью сотворения новых многообещающих средств в педиатрии, в организации Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... работ по практическому использованию и внедрению результатов исследовательских работ (ПК-32);


- учебная: знать: методы культивирования и этичности использования СК (стволовых клеток) различного происхождения; уметь: соотносить виды стволовых клеток по методу культивирования и предполагаемый Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... итог культивирования, также варианты вероятного внедрения в медицине.

обладать: медико-аналитическим понятийным аппаратом.


5. План исследования темы:

5.1. Контроль начального уровня познаний (тестирование).

Избрать один верный ответ.


  1. ^ КУЛЬТУРА КЛЕТОК ЭТО

1) выкармливание клеток, относящихся к одной ткани

2) стволовые Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... клеточки пуповинной крови

  1. абортивные материалы

  2. клеточный дифферон

  1. ^ ВЫДЕЛЕНИЕ КЛЕТОК ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ

1) из крови, с внедрением только лейкоцитов

2) из мягеньких тканей при помощи ферментов

3) помещение в культуру кусочков ткани

4) все ответы верны


  1. ^ КУЛЬТУРА Именуется «ПЕРВИЧНОЙ» КОГДА ОНА

  1. взята конкретно из объекта

  2. получена в Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... итоге пассажирования

  3. извлечена из ткани

  4. получена в итоге клонирования




  1. ^ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК МЛЕКОПИТАЮЩИХ Нужен КОМПЛЕКС Критерий

1) инкубатор

2) неизменная температура

3) особые питательные и газовые среды

4) все ответы верны


  1. ^ ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ ДЛЯ Различных КУЛЬТУР КЛЕТОК РАЗЛИЧАЮТСЯ

1) концентрации глюкозы и составу причин риска

    1. по составу Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... и концентрации глюкозы

    2. по составу, pH, концентрации глюкозы, составу причин роста

    3. по составу причин роста и риска




  1. ^ ЕСТЕСТВЕННЫЕ СУБСТАНЦИИ, СПОСОБНЫЕ Провоцировать

РОСТ, ПРОЛИФЕРАЦИЮ И/Либо ДИФФЕРЕНЦИРОВКУ^ Живых КЛЕТОК Именуются

  1. фактор риска

  2. фактор роста

  3. экологический фактор

  4. культурой




  1. ПРИ КУЛЬТИВИРОВАНИИ ОДНОЙ ИЗ Принципиальных Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... ЗАДАЧ ЯВЛЯЕТСЯ

1) получить материал для культивирования

    1. получить культуру клеток

    2. исключение либо сведение к минимуму внедрение зараженных ингредиентов

    3. обеспечить рост приобретенного материала




  1. ^ Приобретенный МАТЕРИАЛ МОЖНО Растить В

1) суспензии

2) адгезивном состоянии

3) суспензии, или в адгезивном состоянии

4) все ответы верны


  1. ^ ПРИ ВЫРАЩИВАНИИ Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... КЛЕТОК МОГУТ Появиться Последующие Задачи

  1. может начаться клеточное дифференцирование

  2. скопление в питательной среде товаров выделения и омертвевших клеток

  3. контактное ингибирование роста

  4. все ответы верны


^ 10. ДЛЯ ПОДДЕРЖАНИЯ Обычного ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ КУЛЬТУР КЛЕТОК, Также ДЛЯ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ НЕГАТИВНЫХ ЯВЛЕНИЙ Временами ПРОВОДЯТ Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям...,

1) подмену питательной среды

2) пассажирование и трансфекцию клеток.

3) трансдукцию

4) подмену питательной среды, пассажирование и трансфекцию клеток


^ 11. СТРОМАЛЬНЫЕ СТВОЛОВЫЕ Клеточки ИЗВЛЕКАЮТСЯ С помощью ПУНКЦИИ, Потом, В ЛАБОРАТОРНЫХ Критериях Особенным ОБРАЗОМ ИХ

1) культивируют

2) мобилизируют, увеличивают Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... и вводят назад в организм, где при участии особых сигнальных веществ, они направляются к «больному месту»

3) стимулируют фактором роста

4) замораживают


^ 12. РОЛЬ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА ЗАКЛЮЧАЕТСЯ

1) пролиферации

2) в восстановлении костного мозга, крови и иммунной системы пациента после проведения Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... сочетанного исцеления основного заболевания радио- и химиотерапии

3) заживлении раны

4) регенерации


^ 13. ВВЕДЕННЫЕ В ПАЦИЕНТА СТВОЛОВЫЕ Клеточки КОСТНОГО МОЗГА

1) рассасываются либо уничтожаются иммунной системой пациента

2) распределяются в строме органов

3) мигрируют в кровеносном русле

4)репопулируют (обживают) погибший костный мозг, плодятся и Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... восстанавливают его, начиная делать работу погибших клеток

^ 5.2. Главные понятия и положения темы.

1. 1-ый президент Государственного консультативного этического комитета Франции Жан Бернар, реконструируя историю биомедицины с 1930 года, писал о двух революциях: терапевтической и Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... биологической. 1-ая революция, открыв сульфамиды (1937) и пенициллин (1946), наделила население земли „властью побеждать заболевания, длительное время бывшие смертельными, такие как туберкулёз, сифилис, серьёзные инфецирования крови, воспаления эндокринных желёз, биохимические расстройства, лежащие в основе Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... духовных болезней“.

2-ая революция произошла совершенно не так давно: она началась с открытия генетического кода и создания так именуемой „геномной медицины“. После фуррора Яна Вилмута, клонировавшего в 1997 году живое существо — овцу Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... Долли, и работ Томпсона, в 1998 году доказавшего возможность получения стволовых клеток из бластоцист  с последующим культивированием плюрипотентных клеточных линий у человечества, в конце концов, появилась настоящая надежда на излечение разных дегенеративных болезней (см. таблицу) либо Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям..., как минимум, уменьшение страданий пациентов оковём трансплантации стволовых клеток.

В апреле 2003 года в Брюсселе, под эгидой Евро союза, прошла одна из наиболее презентабельных конференций с участием более 600 учёных, посвящённая Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... итогам и перспективам развития трудности стволовых клеток и терапевтического клонирования. Конференция отметила, что за последние годы число личных и государственных компаний, занимающихся этой неувязкой, сократилось с 38 до „наименее дюжины“. Это разъясняется несколькими Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... причинами. Не оправдались коммерческие планы компаний, потребность в стволовых клеточках оказалась очень низкой, что обосновано, приемущественно, неопределёнными и неубедительными плодами клинических наблюдений. Во многих случаях, по мнению профессионалов, не публикуются отрицательные результаты пересадок CК Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям....

Обусловилась настоятельная необходимость в дополнительных теоретических и экспериментальных исследовательских работах с использованием современных способов маркировки и идентификации стволовых клеток, включая анализ их генов и белков. Отсюда, вопрос о стандартизации клеточных технологий – выделении Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... СК, их сохранности и культивирования является одним из насущных в современной медицине.

2. Культивирование клеток представляет собой процесс, средством которого in vitro отдельные клеточки (либо единственная клеточка) искусственно выращиваются в контролируемых критериях Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям.... На практике термин «культура клеток» относится в главном к выращиванию клеток, относящихся к одной ткани, приобретенных от многоклеточных эукариот, в большинстве случаев животных. Историческое развитие технологии и методик выкармливания культур клеток неразрывно связаны Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... с выращиванием тканевых культур и целых органов.

Культивирование - создание искусственных критерий для поддержания процессов жизнедеятельности и размножения микробов in vitro. «Русско-английский словарь определений по микробиологии».

- выкармливание микробов, животных и растительных клеток Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям..., тканей либо органов в искусственных критериях. Большой мед словарь. 2000.

2.1.Выделение клеток

Для культивирования вне организма живы клеточки могут быть получены несколькими методами. Клеточки могут быть выделены из крови, но к росту в Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... культуре способны только лейкоциты. Моноядерные клеточки могут быть выделены из мягеньких тканей при помощи таких ферментов как коллагеназа, трипсин, проназа, разрушающих внеклеточный матрикс. Не считая того, в питательную среду можно поместить куски Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... тканей.

Культуры клеток, взятых конкретно от объекта (ex vivo), именуются первичными. Большая часть первичных клеток, кроме опухолевых, имеют ограниченный срок использования. После определенного количества делений клеточки такие стареют и прекращают делиться, хотя Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... могут при всем этом не потерять жизнеспособность.

Есть иммортализованные («бессмертные») полосы клеток, способные плодиться нескончаемо. Практически у всех опухолевых клеток эта способность является результатом случайной мутации, но у неких лабораторных клеточных линий Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... она приобретена искусственно, методом активации гена теломеразы.

Культивирование клеток

Клеточки выращивают в особых питательных средах, при неизменной температуре, а для клеток млекопитающих обычно нужна также особая газовая среда, поддерживаемая в инкубаторе клеточных культур. Обычно, регулируется Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... концентрация в воздухе углекислого газа и паров воды, но время от времени также и кислорода. Питательные среды для различных культур клеток различаются по составу, pH, концентрации глюкозы, составу причин роста и Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... др. Причины роста, применяемые в питательных средах, в большинстве случаев добавляют совместно с сывороткой крови. Одним из причин риска при всем этом является возможность инфецирования культуры клеток прионами либо вирусами. При культивировании Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... одной из принципиальных задач является исключение либо сведение к минимуму внедрение зараженных ингредиентов. Но на практике это бывает достигнуто не всегда. Лучшим, да и более дорогостоящим методом является добавление заместо сыворотки очищенных причин Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... роста[9].

Клеточки можно растить в суспензии, или в адгезивном состоянии. Некие клеточки (такие, как клеточки крови) в естественных критериях есть во взвешенном состоянии. Есть также полосы клеток, искусственно модифицированных таким макаром, чтоб Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... они не могли прикрепляться к поверхности; это изготовлено для того, чтоб прирастить плотность клеток в культуре. Для выкармливания адгезивных клеток требуется поверхность, к примеру, культура ткани, либо пластик, покрытый элементами Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... внеклеточного матрикса для улучшения адгезивных параметров, также для стимулирования роста и дифференцировки. Большая часть клеток из мягеньких и жестких тканей адгезивны. Из адгезивного типа культуры выделяются органотипические культуры клеток, которые представляют собой Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... трехмерную среду, в отличие от обыкновенной лабораторной посуды. Этот система культивирования на физическом уровне и биохимически более сходна с живыми тканями, но имеет некие технические трудности в обслуживании (к примеру, нуждается в Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... диффузии).

Особенности выкармливания клеток. При выращивании клеток, из-за неизменного деления может появиться их переизбыток в культуре. В итоге чего могут появиться последующие трудности:

-Накопление в питательной среде товаров выделения, в том Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... числе ядовитых.

-Накопление в культуре омертвевших клеток, прекративших жизнедеятельность.

-Скопление огромного количества клеток оказывает негативное воздействие на клеточный цикл, рост и деление замедляются, а клеточки начинают стареть и отмирать (контактное ингибирование Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... роста).

По той же причине может начаться клеточное дифференцирование.

Для поддержания обычного функционирования культур клеток, также для предотвращения негативных явлений временами проводят подмену питательной среды, пассажирование и трансфекцию клеток. Во избежание загрязнения культур микробами, дрожжами Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям..., либо другими линиями клеток, все манипуляции обычно проводят с соблюдением правил асептики в стерильном боксе. Для угнетения микрофлоры в питательную среду могут быть добавлены лекарства (пенициллин, стрептомицин) и противогрибковые препараты Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... (амфотерицин Б).

Одним из товаров метаболизма в клеточках являются кислоты, вследствие чего pH среды равномерно понижается. Для контроля кислотности питательных сред, в их добавляют индикаторы pH. Если культура клеток адгезивная, питательную среду Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... можно вполне подменять.

Пассажирование клеток (разделение) клеток — это отбор маленького количества клеток для выкармливания в другом лабораторном сосуде. Если культура стремительно вырастает, это нужно делать часто, так как в среде истощаются Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... питательные вещества и скапливаются продукты метаболизма. Суспензивные культуры пассажировать проще, потому что для этого довольно всего, только отобрать нужное количество клеток, поместить их в другие сосуды, и добавить свежайшей питательной среды. Адгезивные же клеточки перед Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... этим следует отделить от субстрата и поделить их скопления. В большинстве случаев для этой цели употребляют смесь трипсина и ЭДТА либо другие ферментные консистенции, время от времени довольно только ЭДТА в физиологическом Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... растворе (раствор Версена). Если культура вырастает медлительно, ее обычно кормят без переноса в другой сосуд, временами (обычно раз в 2-3 денька) отбирая часть использованной среды и добавляя свежайшую.

Трансфекция и трансдукция

Трансфекция Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... — процесс введения нуклеиновой кислоты в клеточки человека и животных невирусным способом. Трансфекция обычно включает образование в плазматической мембране отверстий через которые вовнутрь клеточки может просачиваться внеклеточный материал. Трансфицирован может быть генетический Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... материал, таковой как ДНК либо РНК, также белки, к примеру, антитела. Для трансфекции нередко употребляют сильное электронное поле (электропорация) либо электростатически заряженные липиды, способные к образованию липосом, структур, которые соединяются с плазматической мембраной, выбрасывая Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... вовнутрь клеточки заключенный в их материал. Известны и другие способы трансфекции.

Начальный смысл слова трансфекция: зараза для трансформации, т.е. введение в клеточки вирусного генома, в итоге чего начинается зараза. Но Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям..., так как в приложении к человеку и животным термин трансформация имеет другое значение (генетические конфигурации, дозволяющие вести клеточки в культуре в течение долгого времени, преодолевая предел Хейфлика, что приемлимо, к примеру, для Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... раковых клеток), термин трансфекция было предложено использовать как подмену термину трансформация в смысле конфигурации фенотипа методом введения чужеродной нуклеиновой кислоты.

Трансдукция. В клеточки при их выращивании можно внедрять чужеродную ДНК методом трансфекции (невирусный способ Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям...). Нередко данную технологию используют для управляемой экспрессии генов. Сравнимо не так давно для этих целей была удачно реализована трансфекция иРНК.

ДНК также может быть внедрена в геном клеточки при помощи вирусов Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... либо бактериофагов. Они, являясь внутриклеточными паразитами, как нельзя лучше подходят для этих целей, потому что внедрение генетического материала в клетку-хозяина является обыкновенной частью их актуального цикла[.Этот способ именуется трансдукция.

Полосы клеток Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... человека

Как стволовая клеточка начинает делиться, их количество вырастает в контролируемой искусственной среде (культуре), эту «коллекцию» здоровых, делящихся и недифференцированных стволовых клеток можно именовать клеточной линией.  Стволовые клеточки можно провоцировать и вынудить Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... их дифференцироваться в нужный тип клеток, этот процесс именуется контролируемая направленная дифференцировка.  При этом эмбриональные стволовые клеточки демонстрируют способность к большему числу типов клеток по сопоставлению с взрослыми стволовыми клеточками Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям....

Культивирование человечьих клеток несколько противоречит правилам биоэтики, так как изолированно выращиваемые клеточки могут пережить родительский организм, а потом употребляться для проведения тестов либо для разработки новых способов исцеления и извлечения из этого прибыли. 1-ое Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... судебное решение в данной области было вынесено в Верховном суде штата Калифорния по делу «Джон Мур против представителей Калифорнийского университета», согласно которому пациенты не имеют никаких прав принадлежности на полосы клеток, приобретенных Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... из органов, удаленных с их согласия.

2.1.1.Способы хранения ЭСК (бластоцист).

В клиниках ЭКО употребляется две технологии криоконсервации. Разработка, именуемая "неспешным замораживанием", и витрификация.

- "Неспешное замораживание". Эту функцию производят таким макаром: зародыш переносят из Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... пробирки с питательным веществом в среду с криопротекторами, и выдерживают около 10 мин.

Криопротекторы – это вещества, защищающие клеточки от перемораживания, образования кристалликов льда и повреждения клеточки. При неспешном замораживании криопротекторами служат Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... пропиленгликоль и сахароза (просто - тростниковый сахар). Пропиленгликоль защищает клеточки зародыша изнутри, а сахароза - снаружи.

Зародыши с криопротекторной средой засасывают в пластмассовые соломинки, наподобие тех, что подают к коктейлям, только покороче и потоньше, и Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... изготовлены они из нетоксичного пластика. Не считая того, у криосоломинок есть «пробочка» для запечатывания. На соломинке с зародышом пишут несмываемым маркером фамилию пациентки, номер ее карты, дату замораживания и порядковый номер Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... соломинки. Так что спутать их при размораживании нереально.

Дальше соломинку с зародышом начинают медлительно охлаждать. Охлаждать соломинку необходимо очень медлительно, с неизменной скоростью – полградуса за минуту. Для сотворения таких серьезных критерий употребляют Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... особые аппараты – "программируемые замораживатели".

Когда температура снизится до 7 градусов мороза, к соломинке прикасаются охлажденным в водянистом азоте пинцетом - и содержимое соломинки леденеет. Кристаллики нужны, чтоб вызвать процесс вымораживания воды из клеток зародыша – приблизительно так Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям..., как на морозе сохнет белье. Дальше продолжают медлительно охлаждать соломинку до минус 35 градусов, а потом резвым движением переносят ее в водянистый азот, в каком и хранят совсем при температуре 196 градусов мороза Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям....

Слабенькие стороны способа неспешного замораживания, в том, что защита зародышей ото льда в технологии неспешного замораживания построена на вымораживании воды, приводящем к обезвоживанию клеток.

Вымораживание воды для зародышей – "палка о 2-ух Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... концах". С одной стороны, обезвоживание зародышей помогает им пережить замораживание. Но с другой стороны, обезвоживание само по себе часто оказывается гибельным. Речь ведь идет об очень сильном обезвоживании, при неспешном замораживании клеточка теряет до Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... 85-90% воды. При таких потерях из клеточки уходит не только лишь вся так именуемая "свободная вода", но отчасти и "связанная вода", входящая в состав белков. А это приводит к разрушению белковых молекул Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... и, в итоге, к разрушению самой клеточки.

Это небезопасно для зародышей, не очень отлично. Для воплощения этого способа нужна дорогостоящая аппаратура, необоснованно огромные издержки узкого ручного труда.

Аппаратов для неспешного замораживания не Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... может наилучших. Это равносильно тому. Что не может быть наилучших пишущих машинок либо керосиновых ламп. Посреди их, непременно, есть наилучшие, но для современной медицины это не имеет никакого значения.

- Разработка витрификации. При Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... витрификации защита зародышей базирована на другом подходе - здесь не допускается образования кристаллов льда вообщем. Вся жидкость – как в криосоломинке, так и в клеточках зародыша – при охлаждении до температуры водянистого азота перебегает в Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... стекловидное состояние, не образуя кристаллы. Для этого употребляют другие, более сложные криопротекторные среды, чем при неспешном замораживании. Зародыши находятся в криопротекторной среде всего одну-две минутки, а потом набирают в криосоломинку и погружают Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... в водянистый азот.

Способ витрификации еще более неопасен для зародышей, ежели неспешное замораживание. По самым последним данным, при витрификации гибнут и повреждаются менее 10-12% зародышей. Другие зародыши размораживаются без утрат Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям.... В то же время, при применении неспешного замораживания смерть зародышей составляет 25-65%.

Срок хранения замороженных зародышей, если условия хранения размеренны, не ограничен. Но пока известен случай пришествия беременности после переноса зародышей, хранившихся в водянистом азоте Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... 12 лет.

Крио-хранилище представляет собой помещение с сосудами Дьюара – нечто вроде огромного железного термоса, заполненного водянистым азотом. В нем есть особые ячейки, в каких находятся соломинки с замороженными зародышами.

Замораживание зародышей Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... осуществляется для того чтоб сохранить лишниие, но отличные зародыши, не использованные в программке ЭКО. В неких клиниках их просто именуют "излишними" зародышами, но мне такое слово не нравится. Они не излишние, они Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... конкретно лишниие сейчас. Ведь в программке ЭКО не переносят пациентке больше 2-ух зародышей, а другие отличные зародыши замораживают. Если беременность не наступит, оставшиеся зародыши можно разморозить и перенести пациентке в другом цикле.

В нашей Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... стране, к примеру, в соответствии с международными нормами и приказом МЗ РФ (№ 301 от 28.12.1993 года) „излишние“ бластоцисты должны сохраняться некое время в замороженном виде, но затем обязательно уничтожаться. Только в шести странах Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... приняты законы, разрешающие их использование в исследовательских целях: США, Англия, Финляндия, Греция, Голландия и Швеция. В пяти странах на сто процентов запрещено внедрение бластоцист: в Австрии, Дании, Франции, Ирландии и Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... Испании. В большинстве других европейских государств, в частности в Италии и Португалии, а также в России, по этому вопросу нет законодательств. В Германии разрешён ввоз эмбриональных стволовых клеток.

Ввиду пластичности и потенциально Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... неограниченного потенциала самообновления, эмбриональные стволовые клеточки имеют перспективы внедрения в регенеративной медицине и замещении покоробленных тканей. Но в реальный момент не существует никакого мед внедрения эмбриональных стволовых клеток.

2.2.2. Пуповинная кровь. Плацентарно-пуповинная кровь, собранная после Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... рождения малыша, очень богата стволовыми клеточками. Взяв эту кровь и поместив в криобанк стволовых клеток, в предстоящем можно использовать ее для восстановления фактически всех тканей и органов, также для исцеления всех Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... болезней, в том числе и онкологических. Но существует мировоззрение, что количество стволовых клеток в пуповинной крови не довольно велико, и действенное их применение может быть только однократно для самого ребёнка до 10 лет.

Сейчас Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... в главном в банках стволовых клеток хранятся клеточки, выделенные из пуповинной крови, собранной при рождении малыша.
При использовании плодов, в особенности при поздних абортах, для получения эмбриональных стволовых или прогениторных  клеток Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... следует получить информированное согласие дамы на использование абортивного материала и одобрение программки исследования комитетом по биоэтике. Этическими правилами особо подчёркивается необходимость не допускать коммерциализации таких исследовательских работ. Это необходимо, сначала Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям..., для того, чтоб избежать психического давления на мать (при помощи валютного подкупа или путем неверной оценки состояния её плода) при получении её согласия на прерывание беременности. 2.2.3. РСК
Выделение и сохранение стволовых клеток может рассматриваться как Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... форма био страхования, так как с годами количество стволовых клеток в организме миниатюризируется, а конкретно они, по воззрению, ученых, сумеют в дальнейшем стать панацеей от многих заболеваний.

Приобретенный костный Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... мозг обрабатывают, чтоб удалить кровь и куски кости. В приобретенный костный мозг могут добавлять консервант либо замораживать его, чтоб сохранить стволовые клеточки до того времени, пока они пригодятся. Эта процедура известна как криоконсервирование. Стволовые Противопоказания к заготовке стволовых клеток - Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям... клеточки могут быть заморожены в течение многих лет.


proteinovie-zameniteli-i-dobavki.html
protekanie-peremennogo-toka-cherez-razlichnie-nagruzki.html
protekcionizm-i-fritrederstvo-sleduet-li-iskat-zolotuyu-seredinu.html